Tripsina

Tripsina (CAS 9002-07-7) è un enzima proteasi serina ottenuto principalmente dal pancreas bovino o suino. Commercializzata anche come Parenzyme, Tryptar e Trypure.

Dove si usa Tripsina?

• Alimenti: idrolisi proteica controllata di soia, siero di latte e carne per idrolizzati e frazioni peptidiche
• Farmaceutica: debridement di tessuti necrotici in preparati enzimatici e topici
• Biotecnologia e coltura cellulare: distacco di cellule di mammifero adese e mappatura peptidica
• Scinde i legami peptidici in corrispondenza di residui di lisina e arginina.
• Nel distacco cellulare, EDTA viene aggiunto alla soluzione di tripsina come agente chelante per legare calcio e magnesio, indebolendo l'adesione cellula-cellula e migliorando l'accesso della tripsina ai legami peptidici target.
• Nel campo biofarmaceutico, l'applicazione principale era la produzione di insulina, e presto è stata utilizzata in altri campi di coltura cellulare.

Da sapere: Per la coltura cellulare sono generalmente richieste forme di grado sequencing o ricombinanti, per ridurre la variabilità tra lotti e garantire la massima sicurezza.

Note di formulazione

• L'attività è massima a pH 7-9 e 37 °C.
• L'attività è inibita da inibitori delle serin proteasi come PMSF e TLCK, e da chelanti di ioni metallici come EDTA.
• La tripsina non ricombinante ha un limite di chimotripsina di al massimo 50 unità per 2500 unità di tripsina, mentre la tripsina ricombinante non presenta contaminazione con mirosinasi e altri enzimi impuri.
• L'attività specifica della tripsina non ricombinante è ≥2500 unità USP/mg di proteina, mentre quella della tripsina ricombinante è ≥3800 unità USP/mg di proteina.

Specifica tipica

• La specificità della tripsina purificata è migliorata dal trattamento con TPCK, che inattiva la chimotripsina.
• La tripsina porcina 1:250 è disponibile in forma gamma-irradiata.
• Per uso orale, deve essere protetta dalla distruzione gastrica, quindi sono richieste forme gastroresistenti o a rilascio ritardato.

Stato normativo

• La tripsina ha codici ATC B06AA07, D03BA01 e M09AB52.
• La tripsina ricombinante è espressa utilizzando sistemi di E. coli o lievito ricombinanti ed è priva di contaminazione virale esogena.

Stoccaggio, imballaggio e manipolazione

• La tripsina deve essere conservata a -15 to -20 °C.

Domande frequenti su Tripsina

In quali applicazioni viene utilizzata la tripsina ricombinante?

La tripsina ricombinante viene utilizzata nella terapia con cellule immunitarie.

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